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多肽從樹脂切割下來后怎么處理 多肽固相合成法的保護(hù)?

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多肽從樹脂切割下來后怎么處理 多肽固相合成法的保護(hù)?

多肽固相合成法的保護(hù)?

不抖機靈地回答一個問題:Boc-保護(hù)策略固相合成多肽。最后一步是從樹脂上切下多肽,條件是純液體HF冰水浴。每次做的時候都要特別小心,提醒自己一旦看到白霧就關(guān)掉通風(fēng)柜的警報。(其實做好也沒多大危險。)

合成多肽的三個過程?

多肽合成步驟:

樹脂的選擇和氨基酸的固定選擇

多肽合成高分子載體主要有三種:交聯(lián)聚苯乙烯聚酰胺聚乙烯乙二醇脂類樹脂。氨基酸的固定主要是通過在保護(hù)氨基酸的羧基和樹脂的反應(yīng)基之間形成一個共同的價格按鈕來實現(xiàn)的。

二、保護(hù)和去除氨基、羧基和側(cè)鏈

要成功合成具有特定氨基酸順序的多肽,需要保護(hù)暫時不參與形成酰胺鍵的氨基和羧基,同時保護(hù)氨基酸側(cè)鏈上的活性基團(tuán),反應(yīng)完成后去除保護(hù)基團(tuán)。

近年來,F(xiàn)MOC合成法得到了廣泛的應(yīng)用。羧基通常采用形成酯基的方法進(jìn)行保護(hù),甲酯和乙酯是逐步合成中保護(hù)羧基的常用方法。

3、成肽反應(yīng)

固相中的肽反應(yīng)通常是將兩種相應(yīng)的氨基受保護(hù)的氨基酸和羧基受保護(hù)的氨基酸放入溶液中而不形成肽鍵。為了形成酰胺鍵,常用的方法是將羧基活化,變成混合酸酐、活性酯、酰氯或用強縮合劑(如碳二亞氨)形成對稱酸酐形成酰胺鍵。

裂解和合成肽鏈的純化

BOC法用TFA HF裂縫和脫側(cè)鏈保護(hù)基,F(xiàn)MOC法直接用TFA,有時候根據(jù)不同的條件,也會采用其他的脫保護(hù)方法,比如堿、光解、氟離子和氫解。液相色譜、親和層析、毛細(xì)管電泳等。通常用于合成肽鏈的進(jìn)一步精制、分離和純化。