pvdf膜和硝化纖維素膜的優(yōu)缺點(diǎn)？PVDF薄膜是聚偏氟乙烯薄膜。它是一種常用于蛋白質(zhì)印跡的固體支持物。PVDF膜是疏水性的，孔徑有大有小。隨著膜孔徑的減小，膜與低分子量蛋白質(zhì)的結(jié)合更加牢固。硝酸纖維素

pvdf膜和硝化纖維素膜的優(yōu)缺點(diǎn)？

PVDF薄膜是聚偏氟乙烯薄膜。它是一種常用于蛋白質(zhì)印跡的固體支持物。PVDF膜是疏水性的，孔徑有大有小。隨著膜孔徑的減小，膜與低分子量蛋白質(zhì)的結(jié)合更加牢固。

硝酸纖維素膜又稱NC膜，是膠體金試紙中C/T線的載體，也是免疫反應(yīng)發(fā)生的地方，所以NC膜成為本次檢測(cè)中最重要的耗材。

0-@qq.com

1.硝酸纖維素膜

硝酸纖維素膜是蛋白質(zhì)印跡最廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì)，對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的結(jié)合能力，適用于各種顯色方法，包括同位素、化學(xué)發(fā)光(魯米諾)、常規(guī)顯色、染色和熒光顯色。低背景和高信噪比。

NC膜的使用也很簡(jiǎn)單。與不需要甲醛預(yù)處理的情況相比，只需要在非離子水面浸泡并排出膜中的氣泡，然后在電泳緩沖液中平衡幾分鐘即可。比如NC膜很容易密封，不需要特別嚴(yán)格的清洗條件。

轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白質(zhì)在合適的條件下可以長期穩(wěn)定保存，但需要注意的是，純硝酸纖維素膜易碎易卷，要小心處理，不適合需要反復(fù)清洗的應(yīng)用——因?yàn)榻?jīng)不起反復(fù)“折磨”。

在選擇硝酸纖維素膜時(shí)，要注意選擇合適的孔徑。通常使用孔徑為0.45um的大分子蛋白質(zhì)。如果小于20KD，建議選擇0.2um，如果小于7KD，最好選擇0.1um，另外還要注意純NC膜的選擇——摻入醋酸纖維素(CM)的NC膜結(jié)合力會(huì)降低。

另外提醒一句：由于NC膜上結(jié)合的蛋白質(zhì)會(huì)被一些去污劑替代，封閉時(shí)最好使用溫和的Tween20，濃度不要超過0.3%(據(jù)說0.05%效果最好)。

一般來說，NC膜越純，其蛋白結(jié)合能力越高。因此，要提高WB的靈敏度和分辨率，提高所用膜的純度是可以考慮的選擇。

如果NC膜摻雜了一些醋酸纖維素，前面已經(jīng)提到，會(huì)影響蛋白的結(jié)合。Protran是純NC膜，比較脆，機(jī)械抵抗力差，需要小心處理。如果你擔(dān)心自己“手腳粗糙”，那么你可以考慮Opt itran或者Pall的Biotrace NT硝基纖維素轉(zhuǎn)移膜，這款膜以抗污著稱。

卷膜絕對(duì)是最實(shí)惠的選擇，自己剪就好——記住，一定要戴手套操作。

2.PVDF薄膜

與硝酸纖維素膜相比，PVDF膜在蛋白質(zhì)截留、機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)相容性方面具有優(yōu)越的性能。

市面上典型的硝酸纖維素膜的結(jié)合力為80-100g/cm2，而PVDF膜的結(jié)合力為100-200g/cm2(而且PVDF的結(jié)合力比硝酸纖維素膜強(qiáng)6倍！)。

然而，PVDF膜的最大優(yōu)勢(shì)并不僅限于此：更好的機(jī)械強(qiáng)度和耐化學(xué)性使PVDF膜成為各種染色應(yīng)用和多重免疫測(cè)定的理想選擇；此外，單一凝膠的泳道拷貝可用于各種目的，尤其是用于N-末端蛋白質(zhì)測(cè)序。在相當(dāng)苛刻的清洗條件下，當(dāng)尼龍或硝酸纖維素膜降解后，PVDF膜仍保持原來的顏色，笑傲江湖。

所以PVDF是蛋白質(zhì)測(cè)序的唯一選擇。但是不適合熒光。PVDF膜應(yīng)該用100%甲醇預(yù)處理(不超過15秒)，然后用緩沖液平衡后才能使用。而且，如果在應(yīng)用過程中變干了，也要用同樣的程序處理。(但是，如果真的出現(xiàn)這種問題，那是你自己的錯(cuò)。如果不小心，只需要在轉(zhuǎn)膜前處理，可能會(huì)影響后續(xù)的抗體鑒定。).

PVDF膜也分為0.45um和0.2um膜。后者孔徑小，對(duì)小分子蛋白質(zhì)的截留吸附性好，背景可能比前者略高。