熒光定量PCR擴(kuò)增區(qū)相對較小，約200bp，通常以cDNA為模板。如果不注意引物的設(shè)計，很可能落在同一個外顯子上。此時，cDNA和基因組DNA將發(fā)出相同的信號，即出現(xiàn)定量誤差。如果引物與內(nèi)含子交叉，c

熒光定量PCR擴(kuò)增區(qū)相對較小，約200bp，通常以cDNA為模板。如果不注意引物的設(shè)計，很可能落在同一個外顯子上。此時，cDNA和基因組DNA將發(fā)出相同的信號，即出現(xiàn)定量誤差。如果引物與內(nèi)含子交叉，cDNA會發(fā)出信號，而基因組DNA會發(fā)出信號，因為理論上引物的存在，不需要內(nèi)部參照。絕對定量是計算基因在基因組中的拷貝數(shù)。如果是計算基因組中某個基因的拷貝數(shù)，建議絕對量化單拷貝基因組合，否則，結(jié)果很難理解，如果是設(shè)計定量PCR引物，可以參考網(wǎng)頁鏈接