普通pcr引物設(shè)計和熒光定量pcr引物設(shè)計的區(qū)別？實時定量引物設(shè)計的要求比較高，可以按照常用的引物設(shè)計方法進(jìn)行，但擴增片段不宜過大，最好在250bp-100bp之間。同時，要保證這對引物的絕對特異性，

普通pcr引物設(shè)計和熒光定量pcr引物設(shè)計的區(qū)別？

實時定量引物設(shè)計的要求比較高，可以按照常用的引物設(shè)計方法進(jìn)行，但擴增片段不宜過大，最好在250bp-100bp之間。同時，要保證這對引物的絕對特異性，因為如果產(chǎn)生非特異性擴增，模板量就不能準(zhǔn)確測定，熒光定量PCR擴增區(qū)相對較小，約200bp，一般以cDNA為模板。如果不注意引物的設(shè)計，很可能落入同一外顯子中cDNA和基因組DNA都會給出相同的信號，也就是說會出現(xiàn)定量錯誤。如果引物與內(nèi)含子交叉，cDNA會發(fā)出信號，而基因組DNA由于不能完全配對而沒有信號，從而避免了基因組DNA的影響