怎樣用CRISPR實(shí)現(xiàn)基因敲入？一般情況下，sgRNA用于引導(dǎo)cas9蛋白到達(dá)指定的敲入位置，切割原始基因組，并將其轉(zhuǎn)移到靠近敲入位置的基因組序列的供體質(zhì)粒中。質(zhì)粒還包含需要敲入的外源序列。這樣，在切

怎樣用CRISPR實(shí)現(xiàn)基因敲入？

一般情況下，sgRNA用于引導(dǎo)cas9蛋白到達(dá)指定的敲入位置，切割原始基因組，并將其轉(zhuǎn)移到靠近敲入位置的基因組序列的供體質(zhì)粒中。質(zhì)粒還包含需要敲入的外源序列。這樣，在切割cas9蛋白的同時(shí)，通過同源重組將外源基因?qū)牖蚪M。

轉(zhuǎn)基因與基因敲除/敲進(jìn)的區(qū)別？

轉(zhuǎn)基因技術(shù)是利用現(xiàn)代生物技術(shù)，將目標(biāo)基因，經(jīng)過人工分離、重組，進(jìn)入生物體基因組，從而改善生物體原有特性或賦予其新的優(yōu)良特性。除了克隆外源基因和構(gòu)建表達(dá)載體外，cripsr/cas9/piggbac/microinjection還可以實(shí)現(xiàn)遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立、遺傳轉(zhuǎn)化子的篩選、遺傳穩(wěn)定性分析和回交育種。

基因敲除技術(shù)是通過同源重組將外源基因整合到靶細(xì)胞基因組的某一位點(diǎn)，以達(dá)到修飾染色體上某一基因的目的。它針對(duì)的是功能未知但序列已知的序列。它改變生物體的遺傳基因，使特定基因的功能喪失功能，使部分功能受阻，進(jìn)而影響生物體，進(jìn)而推斷基因的生物學(xué)功能