基因克隆的方法有哪些？選擇目的基因并設(shè)計相應(yīng)的引物；用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段；選擇合適的克隆載體（用于保真擴(kuò)增）并將PCR片段連接到克隆載體中；（通常，含有Taq酶的PCR產(chǎn)物末端帶有a，通過體細(xì)

基因克隆的方法有哪些？

選擇目的基因并設(shè)計相應(yīng)的引物；用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段；選擇合適的克隆載體（用于保真擴(kuò)增）并將PCR片段連接到克隆載體中；（通常，含有Taq酶的PCR產(chǎn)物末端帶有a，通過體細(xì)胞的無性繁殖，后代的遺傳基因與母體的遺傳基因完全相同，通過克隆可以獲得個體或單個器官。其基本過程是：將母體的體細(xì)胞核提取并轉(zhuǎn)移到?jīng)]有細(xì)胞核的卵細(xì)胞中。二者融合后，胚胎在營養(yǎng)液中形成，植入某位母親的卵巢內(nèi)生育后代，由提供體細(xì)胞核的母親提供，與提供子宮和卵細(xì)胞的母親無關(guān)。無精子癥卵子結(jié)合的全過程屬于無性繁殖

可以采用PCR技術(shù)

即聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），也稱無細(xì)胞分子克隆或特異DNA序列體外引物定向酶法擴(kuò)增技術(shù)。

基因克隆技術(shù)的原理與方法是什么？在醫(yī)學(xué)上有何意義？

選擇目的基因，設(shè)計相應(yīng)的引物；用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段；選擇合適的克隆載體（進(jìn)行保真度擴(kuò)增）并將PCR片段連接到克隆載體中；（一般情況下，Taq酶的PCR產(chǎn)物末端攜帶a，在酶的作用下，可以在兩端攜帶t溶液1作用將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為有活性的大腸桿菌，在含抗生素的培養(yǎng)基上生長擴(kuò)增，從大腸桿菌中提取質(zhì)粒（即前面的連接產(chǎn)物），酶切測序后將目的基因片段與新的表達(dá)載體連接鑒定一般有兩種方法：1。反轉(zhuǎn)錄：從已知的單鏈mRNA中反轉(zhuǎn)錄出單鏈DNA，然后根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原理合成雙鏈DNA。2、 從已知蛋白質(zhì)的多肽鏈可以推斷出單鏈mRNA上的堿基序列（對應(yīng)密碼子的一個氨基酸），然后從單鏈mRNA上的堿基序列可以推斷出單鏈DNA上的堿基序列，然后再推斷出雙鏈DNA上的堿基組成可以推斷為人工合成（通過PCR）。