高效液相色譜法的原理？高效液相色譜（HPLC）的原理是以液體為流動相，高壓輸注系統(tǒng)，將不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。柱中各組分分離后，進入檢測器進行檢測。高效

高效液相色譜法的原理？

高效液相色譜（HPLC）的原理是以液體為流動相，高壓輸注系統(tǒng)，將不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。柱中各組分分離后，進入檢測器進行檢測。高效液相色譜具有“四高一寬”的特點：①高壓：流動相為液體，流經(jīng)色譜柱時阻力大。為了快速通過色譜柱，必須向載液中加入高壓。

②高速：分析速度快，載體流速快，比經(jīng)典的液相色譜法快得多。一般來說，一個樣品的分析可以在15-30分鐘內(nèi)完成，有些樣品可以在5分鐘內(nèi)完成，一般不到1小時。

③高效：分離效率高。選擇固定相和流動相可獲得最佳的分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效率高出許多倍。

④靈敏度高：紫外檢測器高達0.01ng，進樣量在μL左右。

⑤應(yīng)用范圍廣：70%以上的有機化合物可以用高效液相色譜法進行分析，特別是高沸點、大分子、，極性強、熱穩(wěn)定性差的化合物。

高效液相色譜儀的基本工作原理？

高效液相色譜儀系統(tǒng)由儲液罐、泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成。水庫中的流動相由高壓泵泵入系統(tǒng)。樣品溶液通過進樣器進入流動相，由流動相裝入色譜柱（固定相）。由于樣品溶液中的組分在兩相中的分配系數(shù)不同，它們在兩相中運動時經(jīng)歷了反復(fù)的吸附-解吸分布過程，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號并傳輸?shù)接涗泝x，數(shù)據(jù)被記錄下來以色譜圖的形式打印出來。

高效液相色譜法的原理？

高效液相色譜工作原理：高壓泵將儲液罐中的流動相通過進樣器送入色譜柱，然后從檢測器出口流出。此時，整個系統(tǒng)將充滿流動相。待分離樣品從進樣器進入時，流動相經(jīng)進樣器進入色譜柱進行分離。分離后，不同的組分依次進入檢測器。記錄儀記錄進入檢測器的信號，得到液相色譜圖。高效液相色譜法（HPLC）是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引入氣相色譜理論。從技術(shù)上講，流動相改為高壓輸送。色譜柱采用特殊的小顆粒填充方式，柱效遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的液相色譜（每米板數(shù)可達數(shù)萬或數(shù)十萬）。同時，在柱后連接一個高靈敏度的檢測器，用于對流連續(xù)檢測產(chǎn)品。